北京六一電泳-影響凝膠聚合的因素
1） Acr及Bis的純度：應選用分析純的Acr及Bis，如試劑不純，含有雜質或，則凝膠聚合不均一，或聚合時間延長甚至不聚合， 因而需進一步純化。 Acr和Bis貯液的pH值為4.9-5.2，當pH值的改變大于0.4pH單位則不能使用，因在偏酸或偏堿的環(huán)境中，它們可不斷水解放出和NH4+ 而引起pH值改變，從而影響凝膠聚合。 因此，配制的Acr和Bis貯液應置棕色瓶中，4℃貯存 ，存放期。2）AP、核黃素、TEMED：增加AP和TEMED可加快聚合速率，但過量的AP和TEMED會引起電泳時燒膠和譜帶變形。應選擇合適的配方使聚合在40-60min內完成。
3）pH：堿性條件下聚合快，但堿性過強時膠硬而脆，需高pH時應減少AP和TEMED用量，制酸性膠可加AgNO3等促進聚合。
4）溫度：溫度高聚合快，但高濃度凝膠聚合時易產生小氣泡，低溫(5℃)聚合凝膠會變得脆而混濁，一般25-35℃聚合較好。
5）氧分子：氧分子阻礙凝膠聚合，
凝膠電泳
PAGE應用較廣，可用于蛋白質、酶、核酸等生物分子的分離、定性、定量及少量的制備，還可測定相對分子質量、等電點等。 凝膠電泳又有以下幾種：
凝膠電泳
連續(xù)密度梯度電泳
凝膠雙向電泳
凝膠電泳 （DNA序列分析）
1 儀器： PCR擴增儀（96孔）、序列分析電泳槽：DYCZ-20C\DYCZ-20G、高壓電源：電子天平 (精確1毫克) 、移液槍：WD-2108 、雙顯磁力攪拌器、高壓蒸汽滅菌鍋、pH計、水浴鍋、高速臺式冷凍離心機、微型離心機：WD-2105A/B等
行電泳是不能測得分子量的，常用于酶的鑒定、同工酶分析和提純。 所謂變性凝膠，即在凝膠中加入變性劑，如尿素、SDS()、巰基乙醇、DTT等。這些變性劑可以破壞或改變蛋白質的結構，把大部分蛋白質分離成組成它們的亞基。同時在蛋白質分子周圍包圍了大量負電荷。這種電荷基本上掩蓋了無變性劑存在時正常就有的任何電荷。蛋白質在這種變性凝膠中的遷移率與它們分子量的對數(shù)成直線關系。因此利用變性凝膠進行電泳可以測得蛋白質的分子量。目前應用較多的變性劑為SDS。
