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東南儀誠細(xì)數(shù)PCR技術(shù)的發(fā)展歷程

1983年KaryMullis發(fā)明PCR技術(shù)以來,PCR實(shí)驗(yàn)歷經(jīng)了“三級跳躍式”的發(fā)展歷程。

    從最早期的手工操作PCR反應(yīng),到半自動機(jī)械臂在水浴中操作PCR反應(yīng),再到目前已經(jīng)非常成熟的半導(dǎo)體(Peltier)溫控技術(shù),PCR設(shè)備對操作人員來說已經(jīng)變得越來越友好,越來越便利。

    早期的PCR條件優(yōu)化只能一次又一次地不停嘗試各種實(shí)驗(yàn)條件的組合,直到90年代中期Eppendorf在5331系列PCR上實(shí)現(xiàn)了不同列之間不同溫度的功能,一次實(shí)驗(yàn)就能夠測試12個不同的條件,一下子將PCR實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化的效率提高了10倍以上,這也是我們所熟知的PCR梯度功能。

    PCR儀作為一個成熟的設(shè)備,是否還有發(fā)展的空間呢?

    答案是肯定的,Eppendorf在最新的Mastercycler®X50系列PCR儀上引入了創(chuàng)新的2D梯度功能。

    世界著名的MPICBG(MaxPlanckInstituteofMolecularCellBiologyandGenetics)的科學(xué)家,在使用了EppendorfMastercycler®X50的2D梯度功能后表示,使用2D梯度可以非常方便地在一次實(shí)驗(yàn)中對PCR反應(yīng)過程中的兩個溫度步驟進(jìn)行優(yōu)化(如,變性與退火),一次可以摸索96個不同的溫度條件組合。

    這樣的條件優(yōu)化對于難以擴(kuò)增的高GC含量的模板的條件優(yōu)化顯得尤為重要。

    而這使得PCR條件優(yōu)化的過程有了全新的可能性。

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PCR儀

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